• 生物活性

靶点及简介 ：Alvespimycin hydrochloride 是一种有效的 Hsp90 抑制剂，结合到 Hsp90，EC50 为 62±29 nM。无细胞试验中IC50为62 nM。 Phase 2。

体外研究：

Alvespimycin（17-DMAG）盐酸盐抑制过表达Hsp90客户蛋白Her2的人癌细胞系SKBR3和SKOV3的生长，并导致Her2的下调以及Hsp70的诱导与Hsp90抑制一致，用于EC2降解Her2在SKBR3和SKOV3细胞中分别为8±4nM和46±24nM;对于Hsp70诱导，在SKBR3和SKOV3细胞中EC50分别为4±2 nM和14±7 nM [1]。与载体对照相比，17-DMAG在50nM至500nM的浓度下发挥剂量依赖性细胞凋亡（在24小时和48小时时间点平均P <0.001），其代表药理学可达到的剂量。与许多其他药物相似，17-DMAG还显示慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞的时间依赖性细胞凋亡（P <0.001，在所有剂量中平均），延长暴露24至48小时。此外，17-DMAG治疗24和48小时后比17-AAG更有效[2]。

体内研究：

在0,50,100和200mg / kg二棕榈酰基 - 根赤霉素或0,5,10和20mg / kg 17-DMAG的情况下，在开始每四天腹膜内注射一个月之前使肿瘤生长两个月。尽管样品异质性，HSP90抑制剂处理的动物具有显着低于载体对照处理的动物的肿瘤体积。已显示HSP90抑制剂在胃肠癌的动物模型中引起肝毒性。然而，使用dipalmitoyl-radicicol时肿瘤大小的减少在100 mg / kg时具有统计学意义，而10或20 mg / kg的17-DMAG引起肿瘤大小的显着减少[3]。

细胞实验：

进行MTT测定以确定细胞毒性。将来自CLL患者的总共1×106个CD19选择的B细胞在17-DMAG，17-AAG或载体中孵育24或48小时。然后加入MTT试剂，并在分光光度测量之前将板再温育24小时。通过用膜联蛋白V-荧光素异硫氰酸酯和碘化丙啶（PI）染色来测定细胞凋亡。暴露于药物后，用磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞，并在1倍结合缓冲液中染色。使用Beckman-Coulter模型EPICS XL细胞计通过流式细胞术评估细胞死亡。使用System II软件包分析数据。每个样品计数总共10000个细胞。通过用亲脂性阳离子染料JC-1染色和通过流式细胞术分析来评估线粒体膜电位变化[2]。

动物实验：

小鼠[3]使用年轻雄性CB-17 / IcrHsd-Prkdc-SCID小鼠。通过在胶原溶液中每个移植物混合1×105BPH1细胞和2.5×105CAF制备重组异种移植物，使其凝胶化，用培养基覆盖并培养过夜。允许肿瘤形成超过8周，然后通过腹膜内注射用三种不同剂量的二棕榈酰 - 根赤壳素（50,100和200mg / kg）和17-DMAG（5,10和20mg / kg）治疗4周。每四天在芝麻油中加入化合物。总共12周后，处死小鼠，切除肾脏，将移植物切成两半并拍照，然后进行组织学处理。测量移植物尺寸并使用该公式计算得到的肿瘤体积;体积=宽×长×深度×π/ 6。该公式代表了评估肿瘤体积的保守方法，因为它与较小的非侵入性肿瘤相比，低估了大量侵袭性肿瘤的体积。将切除的移植物固定在10％福尔马林中，包埋在石蜡中并加工用于免疫组织化学。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Ge J, et al. Design, synthesis, and biological evaluation of hydroquinone derivatives of 17-amino-17-demethoxygeldanamycin as potent, water-soluble inhibitors of Hsp90. J Med Chem. 2006 Jul 27;49(15):4606-15.

[2]. Hertlein E, et al. 17-DMAG targets the nuclear factor-kappaB family of proteins to induce apoptosis in chronic lymphocytic leukemia: clinical implications of HSP90 inhibition. Blood. 2010 Jul 8;116(1):45-53.

[3]. Henke A, et al. Reduced Contractility and Motility of Prostatic Cancer-Associated Fibroblasts after Inhibition of Heat Shock Protein 90. Cancers (Basel). 2016 Aug 24;8(9). pii: E77.

• 溶解度及制备方案
  溶解度
  

  DMSO	131 mg/mL (200.55 mM)
  Water	Insoluble
  Ethanol	Insoluble

  制备储备液

  浓度溶剂体积质量	1 mg	5 mg	10 mg
  1 mM	1.5309 mL	7.6545 mL	15.3090 mL
  5 mM	0.3062 mL	1.5309 mL	3.0618 mL
  10 mM	0.1531 mL	0.7655 mL	1.5309 mL
  50 mM	0.0306 mL	0.1531 mL	0.3062 mL