• 生物活性

靶点及简介 ：Infigratinib (BGJ-398) 是 FGFR 家族的有效抑制剂，抑制 FGFR1，FGFR2，FGFR3 和 FGFR4 的 IC50 分别为0.9 nM，1.4 nM，1 nM，60 nM。

体外研究：

Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1，FGFR2和FGFR3，IC50 = ~1 nM，FGFR3K650E，IC50 = 4.9 nM，FGFR4，IC50 = 60 nM。所有其他激酶的IC50值均在μM范围内（FYN，LCK，YES和ABL，IC50分别为1.9,2.5,1.1和2.3μM），VEGFR2，KIT和LYN除外，它们在亚微摩尔浓度下被抑制（IC50分别为0.18,0.75和0.3μM）。 Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1-，FGFR2-和FGFR3依赖性BaF3细胞的增殖，其IC50值在低纳摩尔范围内，与酶促测定中抑制受体激酶活性所观察到的相当。 。对于剩余的细胞，除VEGFR2（IC50 1449和938 nM）外，所有IC 50值均大于1.5μM，其中对FGFR1，FGFR2和FGFR3的选择性至少为400倍[1]。 Infigratinib（BGJ-398）（范围在1 nM和10μM之间）有效抑制FGFR2突变型子宫内膜癌细胞的生长[2]。

体内研究：

Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1，FGFR2和FGFR3，IC50 = ~1 nM，FGFR3K650E，IC50 = 4.9 nM，FGFR4，IC50 = 60 nM。所有其他激酶的IC50值均在μM范围内（FYN，LCK，YES和ABL，IC50分别为1.9,2.5,1.1和2.3μM），VEGFR2，KIT和LYN除外，它们在亚微摩尔浓度下被抑制（IC50分别为0.18,0.75和0.3μM）。 Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1-，FGFR2-和FGFR3依赖性BaF3细胞的增殖，其IC50值在低纳摩尔范围内，与酶促测定中抑制受体激酶活性所观察到的相当。 。对于剩余的细胞，除VEGFR2（IC50 1449和938 nM）外，所有IC 50值均大于1.5μM，其中对FGFR1，FGFR2和FGFR3的选择性至少为400倍[1]。 Infigratinib（BGJ-398）（范围在1 nM和10μM之间）有效抑制FGFR2突变型子宫内膜癌细胞的生长[2]。

激酶实验：

Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1，FGFR2和FGFR3，IC50 = ~1 nM，FGFR3K650E，IC50 = 4.9 nM，FGFR4，IC50 = 60 nM。所有其他激酶的IC50值均在μM范围内（FYN，LCK，YES和ABL，IC50分别为1.9,2.5,1.1和2.3μM），VEGFR2，KIT和LYN除外，它们在亚微摩尔浓度下被抑制（IC50分别为0.18,0.75和0.3μM）。 Infigratinib（BGJ-398）抑制FGFR1-，FGFR2-和FGFR3依赖性BaF3细胞的增殖，其IC50值在低纳摩尔范围内，与酶促测定中抑制受体激酶活性所观察到的相当。 。对于剩余的细胞，除VEGFR2（IC50 1449和938 nM）外，所有IC 50值均大于1.5μM，其中对FGFR1，FGFR2和FGFR3的选择性至少为400倍[1]。 Infigratinib（BGJ-398）（范围在1 nM和10μM之间）有效抑制FGFR2突变型子宫内膜癌细胞的生长[2]。

细胞实验：

在补充有10％FBS，4.5g / L葡萄糖，1.5g / L碳酸氢钠和Pen / Strep的RPMI-1640培养基中培养鼠BaF3细胞系。细胞每周传代两次。使用荧光素酶生物发光测定评估化合物介导的对BaF3细胞增殖和活力的抑制。使用μFill液体分配器在新鲜培养基中以50μL/孔将指数生长的BaF3或BaF3Tel-TK细胞接种到384孔板（4250细胞/孔）中。将Infigratinib（BGJ-398）在DMSO中连续稀释并排列在聚丙烯384孔板中。然后通过使用pintool转移装置将50nL化合物转移到含有细胞的平板中，并将平板在37℃（5％CO 2）下孵育48小时。然后加入25μLBright-Glo，并使用Analyst-GT定量发光。定制曲线拟合软件用于产生百分比细胞活力的逻辑拟合作为抑制剂浓度的对数的函数。 IC50值被确定为将细胞活力降低至50％DMSO对照所需的化合物浓度[1]。

动物实验：

将Infigratinib（BGJ-398）配制成PEG300 / D5W（2：1，v / v）中的悬浮液，并以10和30mg / kg / qd的剂量口服给药连续12天。通过ANOVA和事后Dunnett检验分析肿瘤和体重数据，用于治疗与对照组的比较。事后Tukey测试用于组内比较。使用GraphPad prism 4.02进行统计分析。作为功效的度量，计算T / C（％）值。大鼠[1]使用6-9周龄的雌性裸Rowett大鼠。将Infigratinib（BGJ-398）配制成乙酸 - 乙酸盐缓冲液pH4.6 / PEG300（1：1，v / v）中的溶液，并通过管饲法每天施用于荷瘤大鼠（n = 8）连续20天剂量为5,10和15mg / kg / qd（游离碱当量）。施用量为5 mL / kg。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Guagnano V, et al. Discovery of 3-(2,6-Dichloro-3,5-dimethoxy-phenyl)-1-{6-[4-(4-ethyl-piperazin-1-yl)-phenylamino]-pyrimidin-4-yl}-1-me thyl-urea (NVP-BGJ398), A Potent and Selective Inhibitor of the Fibroblast Growth Factor Receptor Family of Receptor T

[2]. Konecny GE, et al. Activity of the fibroblast growth factor receptor inhibitors dovitinib (TKI258) and NVP-BGJ398 in human endometrial cancer cells. Mol Cancer Ther. 2013 May;12(5):632-42.

[3]. Liu H, et al. Identifying and Targeting Sporadic Oncogenic Genetic Aberrations in Mouse Models of Triple Negative Breast Cancer. Cancer Discov. 2018 Mar;8(3):354-369.

• 溶解度及制备方案
  

  Solvent	Max Conc. mg/mL	Max Conc. mM
  Solubility
  	DMSO	6.67	11.9
  	Water	0.05	0.09
  	DMF	5.0	8.92
  	DMF:PBS (pH 7.2) (1:30)	0.03	0.05

  Preparing Stock Solutions

  Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
  1 mM	1.78 mL	8.92 mL	17.84 mL
  5 mM	0.36 mL	1.78 mL	3.57 mL
  10 mM	0.18 mL	0.89 mL	1.78 mL
  50 mM	0.04 mL	0.18 mL	0.36 mL