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首页 Ubiquitination/ Proteasome Autophagy Torin 1 (CAS#1222998-36-8 目录号D910131)
Torin 1 是一种有效的 mTOR 抑制剂,IC50 为 3 nM。Torin 1 抑制 mTORC1/2 复合物,IC50 值在 2 和 10 nM 之间。

规格 价格 库存 数量
5mg ¥ 695.00 100
25mg ¥ 2385.00 100
50mg ¥ 4580.00 100
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概述
产品名 Torin 1
CAS号 1222998-36-8
目录号 D910131
化学式 C₃₅H₂₈F₃N₅O₂
分子量 607.64
溶解度 <1.22mg/mL in DMSO, ≥ 2.42 mg/mL in EtOH with ultrasonic and warming, <2.39 mg/mL in H2O
靶点 MTOR inhibitor,potent and selective
储存条件 Desiccate at -20°C
用途 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗
纯度 >98.5%
质控及产品安全说明书
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  • 生物活性
    Torin 1 是一种有效的 mTOR 抑制剂,IC50 为 3 nM。Torin 1 抑制 mTORC1/2 复合物,IC50 值在 2 和 10 nM 之间。


靶点及简介 :MTOR inhibitor,potent and selective


体外研究:

Torin1(250 nM)完全抑制增殖并导致G1 / S细胞周期停滞,并且在野生型MEF中比50nM雷帕霉素更大程度地降低细胞大小[1]。 Torin1在mTOR和PI3Kis之间的选择性超过800倍,并且相对于其他PIKK家族激酶具有非常高的选择性,但DNA-PK除外[2]。


体内研究:

Torin1(250 nM)完全抑制增殖并导致G1 / S细胞周期停滞,并且在野生型MEF中比50nM雷帕霉素更大程度地降低细胞大小[1]。 Torin1在mTOR和PI3Kis之间的选择性超过800倍,并且相对于其他PIKK家族激酶具有非常高的选择性,但DNA-PK除外[2]。


激酶实验

为了产生可溶性mTORC1,产生HEK-293T细胞系,其使用水疱性口炎病毒G-假型MSCV逆转录病毒稳定表达N末端FLAG标记的Raptor。对于mTORC2,产生HeLa细胞,其稳定表达N末端FLAG标记的Protor-1。通过在50mM HEPES,pH7.4,10mM焦磷酸钠,10mMβ-甘油磷酸钠,100mM NaCl,2mM EDTA,0.3%CHAPS中裂解细胞来纯化两种复合物。将细胞在4℃下裂解30分钟,并通过在13,000rpm下微量离心10分钟除去不溶性级分。将上清液与FLAG-M2单克隆抗体 - 琼脂糖一起温育1小时,然后用裂解缓冲液洗涤三次,用含有终浓度0.5mol / L NaCl的裂解缓冲液洗涤一次。用50mM HEPES,pH 7.4,100mM NaCl中的100μg/ mL 3×FLAG肽洗脱纯化的mTORC1。可以将洗脱液等分并储存在-80℃。激酶测定在30°C下进行20分钟,最终体积为20μL,由激酶缓冲液(25 mM HEPES,pH 7.4,50 mM KCl,10 mM MgCl2,500μMATP)和150 ng无活性S6K1组成或Akt1作为底物。加入80μL样品缓冲液终止反应,煮沸5分钟。随后通过SDS-PAGE和免疫印迹分析样品。


细胞实验

在第0天,将96孔板接种每孔500个细胞并生长过夜。在第1天,用合适的化合物处理细胞,随后在第3-5天进行分析。为了分析,将板在室温下孵育60分钟;向每个孔中加入50μLCellTiter-Glo试剂,并将平板在轨道振荡器上混合12分钟。在标准板发光计上量化发光。


动物实验

对于药效学实验,首先将torin 1粉末以25mg / mL溶解在100%N-甲基-2-吡咯烷酮中,然后在注射前用无菌50%PEG400以1:4稀释。在药物治疗之前,将6周龄雄性C57BL / 6小鼠禁食过夜。通过IP注射用载体(10小时)或26小鼠(20mg / kg,2小时,6小时或10小时)处理小鼠,然后在处死前1小时再处理(CO 2窒息)。收集组织并在干冰上冷冻。将冷冻组织在冰上解冻,并在组织裂解缓冲液(50mM HEPES,pH 7.4,40mM NaCl,2mM EDTA,1.5mM原钒酸钠,50mM氟化钠,10mM焦磷酸钠,10mM钠β)中超声处理裂解。 - 甘油磷酸盐,0.1%SDS,1.0%脱氧胆酸钠和1.0%Triton,补充有蛋白酶抑制剂混合物片剂)。使用Bradford测定法测量澄清裂解物的浓度,随后通过蛋白质含量标准化样品并通过SDS-PAGE和免疫印迹分析。



  • 溶解度及制备方案

    Concentration / Solvent Volume / Mass

    1 mg

    5 mg

    10 mg

    1 mM

    1.65 mL

    8.23 mL

    16.46 mL

    5 mM

    0.33 mL

    1.65 mL

    3.29 mL

    10 mM

    0.16 mL

    0.82 mL

    1.65 mL

    50 mM

    0.03 mL

    0.16 mL

    0.33 mL


请将产品保持在 -20°C 以下以进行长期储存。


不用于人类、兽医诊断或治疗用途。


产品数据表中标明了每种产品的特定存储和处理信息。大多数产品在推荐条件下都是稳定的。有时,产品的运输温度与建议的储存温度不同。许多产品的短期储存在与长期储存所需的温度不同的温度下在短期内是稳定的。

我们确保产品在保持试剂质量的条件下运输。收到产品后,请遵循产品数据表上的存储建议。

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