规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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50mg | ¥ 520.00 | 100 | |
200mg | ¥ 1500.00 | 100 |
别名 | CP358774, NSC 718781, Tarceva, 厄洛替尼,埃罗替尼 |
产品名 | Erlotinib |
CAS号 | 183321-74-6 |
目录号 | D807786 |
化学式 | C₂₂H₂₃N₃O₄ |
分子量 | 393.44 |
溶解度 | ≥ 19.65 mg/mL in DMSO, ≥ 30.27 mg/mL in EtOH with gentle warming |
靶点 | EGFR:2 nM (IC50, Cell Free Assay) |
储存条件 | Store at -20°C |
用途 | 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗 |
纯度 | >99% |
靶点及简介 :EGFR tyrosine kinase inhibitor. Erlotinib是一种治疗非小细胞肺癌的药物。抑制纯化 EGFR 激酶的 IC50 为2 nM。
Erlotinib (CP-358774) 是一种EGFR抑制剂,IC50 为 2 nM,对EGFR的敏感性比对人c-Src 或 v-Ab高1000多倍。Erlotinib 可降低完整肿瘤细胞的 EGFR 自磷酸化,IC50 为 20 nM。Erlotinib 用于非小细胞肺癌的研究。
分子量 | 393.44 | ||
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化学式 | C22H23N3O4 | ||
CAS号 | 183321-74-6 | ||
储存条件 | 3年 | -20°C | 粉状 |
1年 | -80°C | 溶于溶剂 |
体外研究
厄洛替尼(CP-358,774)也是EGFR重组细胞内(激酶)结构域的有效抑制剂,IC50为1 nM。厄洛替尼强烈抑制DiFi细胞的增殖,对于8天的增殖试验,IC50为100 nM [1]。与单独的任一种药剂相比,B-DIM和厄洛替尼(2μM)的组合导致BxPC-3细胞中集落形成的显着抑制。与单独使用任一种药物的细胞凋亡作用相比,B-DIM和厄洛替尼(2μM)的组合仅在BxPC-3细胞中导致显着的细胞凋亡诱导[2]。
体内研究
在实验条件下,与未处理对照相比,B-DIM和厄洛替尼(50mg / kg,ip)处理组合显示肿瘤重量显着降低(P <0.01)[2]。与CP +载体(V)大鼠相比,厄洛替尼(20mg / kg,po)显着减弱顺铂(CP)诱导的体重(BW)损失(P <0.05)。厄洛替尼治疗显着改善CP-N(正常对照组,NC)大鼠的肾功能。 CP +厄洛替尼(E)大鼠血清肌酐(s-Cr)水平显着降低(P <0.05),血尿素氮(BUN)(P <0.05),尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)指数(P <0.05),与CP + V大鼠相比,尿量(UV)(P <0.05)和Cr清除率(Ccr)显着增加(P <0.05)[3]
激酶实验
激酶反应在50μL50mM HEPES(pH 7.3)中进行,含有125 mM NaCl,24 mM MgCl 2,0.1 mMNa3VO4,20μMATP,1.6μg/ mL EGF和15 ng EGFR,从A431中亲和纯化细胞膜。加入DMSO中的化合物,使DMSO的最终浓度为2.5%。通过添加ATP引发磷酸化,并在室温下继续进行8mm,持续摇动。通过抽吸反应混合物终止激酶反应,并用洗涤缓冲液洗涤4次。通过用50μL每孔HRP-缀合的PY54抗磷酸酪氨酸抗体孵育25mim来测量磷酸化PGT,在封闭缓冲液(3%BSA和0.05%Tween 20的PBS溶液)中稀释至0.2μg/ mL。通过抽吸除去抗体,并用洗涤缓冲液洗涤板4次。通过添加每孔50μL的TMB微孔过氧化物酶底物来培养结肠信号,并通过添加0.09M硫酸(每孔50μL)来终止。通过测量450nm处的吸光度来估计磷酸酪氨酸。对照的信号通常为0.6-1.2吸光度单位,在没有AlP,EGFR或POT的孔中基本上没有背景,并且与孵育10毫米的时间成比例[1]。
细胞实验
为了测试用B-DIM,厄洛替尼或其组合处理的细胞的活力,将BxPC-3和MIAPaCa细胞接种(每孔3,000-5,000)在96孔板中并在37℃温育过夜。最初测试B-DIM(10-50μM)和厄洛替尼(1-5μM)的浓度范围。基于初始结果,选择B-DIM(20μM)和厄洛替尼(2μM)的浓度用于所有测定。 B-DIM(20μM),厄洛替尼(2μM)和组合对BxPC-3和MIAPaCa细胞的作用在72小时后通过标准MTT测定法测定并重复三次。通过Tecan微孔板荧光计在595nm处测量颜色强度。 DMSO处理的细胞被认为是未处理的对照并且被指定为100%的值。除上述检测外,我们还进行了克隆形成试验,以评估治疗效果[2]。
动物实验
小鼠[2]将雌性ICR-SCID(6-7周龄)小鼠随机分成下列治疗组(n = 7):( a)未治疗的对照; (b)仅B-DIM(50 mg / kg体重),每天一次胃内注射; (c)厄洛替尼(50mg / kg体重),每天腹腔注射15天;和(d)B-DIM和厄洛替尼,按照时间表进行个别治疗。在最后一剂治疗后第3天处死所有小鼠,并测定它们的体重。将组织的一部分在液氮中快速冷冻并储存在-70℃以备将来使用,另一部分在福尔马林中固定并加工成石蜡块。固定组织切片的H&E染色用于确认每个胰腺中肿瘤的存在。大鼠[3]使用体重为180至210g的6周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠。顺铂(CP)在盐水中以1mg / mL的浓度新鲜制备,然后在第0天以7mg / kg的剂量腹膜内注射SD大鼠(n = 28)。为了研究厄洛替尼的作用,28 CP -N-大鼠分为两组。从第-1天开始,每天通过口服管饲给每只动物的单独组(n = 14)施用厄洛替尼(20mg / kg)(CP + E,n = 14)或载体(CP + V,n = 14)(在CP注射前24小时至第3天。媒介物处理组接受等量的盐水。将6周龄的5只雄性SD大鼠用作正常对照组(NC,n = 5)。从第-1天到第3天,通过口服管饲法每天给NC大鼠施用等量的盐水。在第4天(CP注射后96小时),将每只大鼠麻醉并在心脏穿刺后通过放血处死;通过心脏穿刺收集血液并收集肾脏。肾组织分裂;将分开的部分在液氮中快速冷冻或在2%多聚甲醛/磷酸盐缓冲盐水(PBS)中固定以备后用。所有手术均在乙醚气体麻醉下进行,并且尽一切努力使痛苦最小化。
验证:
参考文献:
DMSO | 79 mg/mL (200.79 mM) |
Ethanol (warmed with 50ºC water bath) | 11 mg/mL (27.96 mM) |
Water | Insoluble |
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
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1 mM | 2.5417 mL | 12.7084 mL | 25.4168 mL |
5 mM | 0.5083 mL | 2.5417 mL | 5.0834 mL |
10 mM | 0.2542 mL | 1.2708 mL | 2.5417 mL |
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液。
一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。(为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间)。
我们确保产品在保持试剂质量的条件下运输。收到产品后,请遵循产品数据表上的存储建议。