• 生物活性

靶点及简介 ：

A potent PARP1/PARP2 inhibitor.  Olaparib (AZD2281; KU0059436) 是一种有效的 PARP 抑制剂，抑制 PARP-1 和 PARP-2 的 IC50 分别为 5 和 1 nM。其对PARP1/2的作用比对Tankyrase-1效果高300倍。在BRCA突变的细胞中，Olaparib可以显著地诱导线粒体自噬相关的细胞自噬。

体外研究：

    Olaparib（AZD2281）是PARP-1和PARP-2的单位数纳摩尔抑制剂，显示出对抗BRCA1缺陷的乳腺癌细胞系的独立活性。 Olaparib应用于SW620细胞裂解液，并确定PARP-1抑制的IC50约为6 nM，PARP-1活性的总消融浓度为30-100 nM [1]。

体内研究：

    携带SW620异种移植肿瘤的动物用奥拉帕尼（10mg / kg，口服）与替莫唑胺（TMZ）（50mg / kg，口服）联合治疗，每天一次，连续5天，之后使肿瘤生长[1] ]。 Olaparib增加了在DWC模型中建立的Calu-6肿瘤中的血管灌注。给予奥拉帕尼（50mg / kg，口服）作为单一药剂（上图）或与辐射组合（下图）导致Calu-6肿瘤中荧光强度的增加[2]。

激酶实验：

    该测定确定了奥拉帕尼抑制PARP-1酶活性的能力。通过使用PARP-1测定的变体测量PARP-2活性抑制，其中PARP-2蛋白（重组体）在96孔白壁板中被PARP-2特异性抗体结合。在3H-NAD + DNA添加后测量PARP-2活性。洗涤后，加入闪烁剂以测量掺入3H的核糖基化。对于端锚聚合酶-1，开发了AlphaScreen测定法，其中在384孔ProxiPlate测定中将HIS标记的重组TANK-1蛋白与生物素化的NAD +一起温育。添加α珠以结合HIS和生物素标签以产生接近信号，而TANK-1活性的抑制与该信号的损失成正比。所有实验至少重复三次[1]。

细胞实验：

    PF50值是增强因子，其计算为对照生长与烷基化剂甲基甲磺酸盐（MMS）的IC50除以MMS与PARP抑制剂组合的IC50的比率。使用HeLa B细胞，并以固定的200nM浓度测试Olaparib用于MMS筛选。对于在SW620结肠直肠细胞系上测试Olaparib，使用的浓度为1,3,10,100和300nM。通过使用磺酰罗丹明B（SRB）测定评估细胞生长[1]。

动物实验：

    小鼠[2]将携带220-250mm 3肿瘤的小鼠随机分成4个治疗组（n = 5）：A;载体对照（PBS中10％DMSO / 10％2-羟基 - 丙基-β-环糊精，每天口服强饲5天），B;奥拉帕尼（通过口服强饲法每天50mg / kg，持续5天），C; 10 Gy分次放疗（每日2 Gy，连续5天），D; Olaparib和10 Gy（5×2 Gy）分次放疗（每天2 Gy剂量放射前30分钟给予olaparib）。每天测定肿瘤体积测量值，直至达到1000mm 3。对于每组中的个体肿瘤，计算每个肿瘤从治疗开始时的四倍大小的天数（相对肿瘤体积×4; RTV4）。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Menear KA, et al. 4-[3-(4-cyclopropanecarbonylpiperazine-1-carbonyl)-4-fluorobenzyl]-2H-phthalazin-1-one: a novel bioavailable inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase-1. J Med Chem. 2008 Oct 23;51(20):6581-91

[2]. Senra JM, et al. Inhibition of PARP-1 by olaparib (AZD2281) increases the radiosensitivity of a lung tumor xenograft.Mol Cancer Ther. 2011 Oct;10(10):1949-58.

[3]. Yasukawa M, et al. Synergetic Effects of PARP Inhibitor AZD2281 and Cisplatin in Oral Squamous Cell Carcinoma in Vitro and in Vivo. Int J Mol Sci. 2016 Feb 24;17(3):272.

[4]. Bian X, et al. PTEN deficiency sensitizes endometrioid endometrial cancer to compound PARP-PI3K inhibition but not PARP inhibition as monotherapy. Oncogene. 2018 Jan 18;37(3):341-351.

• 溶解度及制备方案
  

  DMSO	87 mg/mL     (200.25 mM)
  Water	Insoluble
  Ethanol	Insoluble

  制备储备液

  Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
  1 mM	2.30 mL	11.51 mL	23.02 mL
  5 mM	0.46 mL	2.30 mL	4.60 mL
  10 mM	0.23 mL	1.15 mL	2.30 mL
  50 mM	0.05 mL	0.23 mL	0.46 mL

  
  

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