• 生物活性

靶点及简介 ：

Proteasome inhibitor, Cell permeable, reversible.

MG-132是一种有效，可逆，能渗透细胞的 20S蛋白酶体 抑制剂。它抑制蛋白酶体胰凝乳蛋白酶样肽酶活性的 IC50值为 24.2 nM。

MG-132是一种蛋白酶体抑制剂，IC50为100 nM，也抑制钙蛋白酶，IC50为1.2 μM。MG132通过诱导细胞周期停滞以及引发细胞凋亡来抑制HeLa细胞的生长。MG-132 (10 μM) 通过抑制蛋白酶体介导的IκBα降解，有效抑制A549细胞中TNF-α诱导的NF-κB活化。MG132可以抑制NLRP1的活化。

体外研究：在HeLa细胞中观察到剂量依赖性的细胞生长抑制，IC50为约5μMMG132持续24小时。 MG132通过诱导细胞周期停滞以及引发细胞凋亡来抑制HeLa细胞的生长[2]。 MG-132以时间和剂量依赖性方式抑制C6神经胶质瘤细胞增殖（24小时时的IC 50值为18.5μM）。 MG-132（18.5μM）在3小时时抑制蛋白酶体活性约70％。 MG-132通过下调抗细胞凋亡蛋白Bcl-2和XIAP，促凋亡蛋白Bax和半胱天冬酶-3的上调以及切割的C端85kDa PARP的产生来诱导细胞凋亡。 MG-132还会使活性氧增加5倍以上[3]。孵育48小时后MG-132对HeLa，CaSki和C33A宫颈癌细胞存活率的IC50分别为2.1,3.2和5.2μM[4]。

体内研究：使用sc异种移植模型检查MG-132对宫颈癌的体内抗肿瘤活性。使用以下方案以1mg / kg注射MG-132：对于携带HeLa肿瘤的小鼠，第1,4,8,12,15,18,23和26天。与对照相比，MG132的生长抑制率为49％[4]。 MG-132（ip，0.1 mg / kg / day）通过调节ERK1 / 2和JNK1信号通路，减轻压力超负荷引起的心脏肥大，改善腹主动脉条带（AAB）大鼠的心脏功能[5]。

激酶实验：在6孔板（3×10 5个细胞/孔）上生长24小时后，用PBS（对照）或18.5μMMG-132在37℃下处理C6神经胶质瘤细胞3,6,12或24小时。 。用细胞刮刀从培养皿中彻底刮下细胞，并用冷PBS洗涤。以800×g离心10分钟后，将细胞沉淀悬浮于冰冷的缓冲液（50mM Tris-HCl，pH7.5,20μMATP，5mM MgCl 2,1mM二硫苏糖醇和20％甘油）中并用Pyrex玻璃微量发生器（20招）。将匀浆在4℃以15000×g离心10分钟以获得上清液。使用蛋白质测定试剂盒测定蛋白质浓度。将总共10μL（1μg/μL）的每种新鲜上清液在96孔板中在37℃下与10μL300μM琥珀酰-LLVY-AMC和85μL测定缓冲液一起孵育30分钟（ 20mM Tris-HCl，pH 7.5和20％甘油）。荧光AMC的释放用荧光分光光度计在440nm测量，激发波长为380nm [3]。

细胞实验：将C6神经胶质瘤细胞接种到96孔微量培养板（3×10 4细胞/孔）上并培养24小时。用PBS或MG-132终浓度分别处理10,20,30和40μM的细胞。在MG-132处理后3,6,12和24小时使用MTT测定评估细胞活力。使用自动多孔分光光度计读取570nm处的吸光度值。使C6神经胶质瘤细胞（3×10 5个细胞/孔）在6孔培养板中的盖玻片上生长24小时。然后将细胞用PBS（对照）或18.5μMMG-132在37℃处理24小时。将在玻璃盖玻片上生长的细胞在室温下在甲醇中固定5分钟。将固定的细胞用PBS洗涤两次，然后在室温下与Hoechst 33342一起温育5分钟并在荧光显微镜下观察。碎片或凝聚的细胞核被评为凋亡[3]。

动物实验：用HeLa，CaSki或C33A（1×10 7个细胞）皮下接种小鼠[4] CB-17 / lcr-scid / scidJcl小鼠。允许肿瘤生长1周。杀死小鼠并除去肿瘤。然后将肿瘤切成2mm直径的片并将sc移植到CB-17 / lcr-scid / scidJcl小鼠中（每组n = 6）。接种一周后，每周两次静脉注射盐水（对照），MG-132（1mg / kg /剂量）治疗小鼠，持续4周。在每次注射之前测量肿瘤的体积（V），如使用等式V = a×b2 / 2估计的，其中a和b分别是由卡尺测量的肿瘤的主轴和短轴。大鼠[5]雄性Sprague-Dawley大鼠（8周龄，180-230g）用于建立压力超负荷模型。将所有动物分成四组（每组10只大鼠）:( i）载体处理的假组; （ii）MG-132治疗的假组; （iii）载体治疗的腹主动脉条带（AAB）组; （iv）MG-132处理的AAB组。在腹膜内戊巴比妥（50mg / kg）麻醉下，使用围绕腹主动脉连接两次的5-0缝线产生AAB，其中插入21号针。然后使针缩回，产生70-80％的收缩，外主动脉直径为~0.8mm。在假手术大鼠中，除了主动脉收缩外，进行相同的手术。在手术后第3天，给MG-132治疗的大鼠腹膜内注射0.1mg / kg /天的MG-132，持续8周。所有对照动物仅注射相应体积的载体（0.1％DMSO）。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Braun HA, et al. Tripeptide mimetics inhibit the 20 S proteasome by covalent bonding to the active threonines. J Biol Chem. 2005 Aug 5;280(31):28394-401.

[2]. Han YH, et al. The effect of MG132, a proteasome inhibitor on HeLa cells in relation to cell growth, reactive oxygen species and GSH. Oncol Rep. 2009 Jul;22(1):215-21.

[3]. Fan WH, et al. Proteasome inhibitor MG-132 induces C6 glioma cell apoptosis via oxidative stress. Acta Pharmacol Sin. 2011 May;32(5):619-25.

[4]. Matsumoto Y, et al. Enhanced efficacy against cervical carcinomas through polymeric micelles physically incorporating theproteasome inhibitor MG132. Cancer Sci. 2016 Jun;107(6):773-81.

[5]. Chen B, et al. MG132, a proteasome inhibitor, attenuates pressure-overload-induced cardiac hypertrophy in rats by modulation of mitogen-activated protein kinase signals. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 2010 Apr;42(4):253-8.

• 溶解度及制备方案

储备液配制

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