• 生物活性

靶点及简介 ：Disulfiram 是特异性的乙醛脱氢酶1型抗体 (ALDH1) 抑制剂，可以通过对酒精产生急性敏感性来治疗慢性酗酒。

体外研究：

在诱导凋亡的癌细胞死亡之前，双硫仑铜复合物有效抑制培养的乳腺癌MDA-MB-231和MCF10DCIS.com细胞中的蛋白酶体活性，但不是正常的永生化MCF-10A细胞[1]。双硫仑（DS）是临床上使用的抗酗酒药物，以剂量依赖性方式强烈抑制组成型和5-FU诱导的NF-κB活性。双硫仑抑制NF-κB核转位和DNA结合活性，但对5-FU诱导的IkappaBalpha降解没有影响。双硫仑显着增强5-FU对DLD-1和RKO（WT）细胞系的细胞凋亡作用，并协同增强5-FU对两种细胞系的细胞毒性。双硫仑还有效地在体外消除5-FU抗性细胞系H630（5-FU）中的5-FU化学抗性[2]。奥塞米韦减少活细胞数量，并且添加CuCl2显着增强DSF诱导的细胞死亡至不到对照的10％[3]。给予黑色素瘤细胞与Cu2 +或Zn2 +联合使用的双硫仑可降低细胞周期蛋白A的表达，并在体外降低浓度，而不是单独使用双硫仑[4]。

体内研究：

双硫仑显着抑制肿瘤生长（74％），与体内蛋白酶体抑制相关（通过降低肿瘤组织蛋白酶体活性水平和泛素化蛋白和天然蛋白酶体底物p27和Bax的积累来测量）和细胞凋亡诱导（如caspase所示）在携带MDA-MB-231肿瘤异种移植物的小鼠中激活和凋亡细胞核形成[1]。双硫仑阻断P-糖蛋白挤压泵，抑制转录因子核因子-κB，使肿瘤对化学疗法敏感，减少血管生成，并抑制小鼠中的肿瘤生长。双硫仑抑制严重联合免疫缺陷小鼠移植的黑色素瘤的生长和血管生成，这些作用通过补充Zn2 +而得到加强[4]。

细胞实验：

在用10％FBS刺激的培养物中研究了双硫仑（0.15-5.0μM）或二乙基二硫代氨基甲酸钠（1.0μM）对恶性细胞系增殖的影响。如下所述，细胞数量在24至72小时后定量。在一些实验中，在细胞铺板后立即加入双硫仑。在其他实验中，将细胞铺板并使其生长24至72小时，然后加入含有双硫仑的新鲜培养基并在24至72小时后测定细胞数。在双硫仑与N，N'-双（2-氯乙基-N-亚硝基脲（卡莫司汀，1.0-1,000μM）或顺铂（0.1-100μg/ mL）加入培养基之间研究协同作用。金属离子对双硫仑的影响是用0.2到10μM的Cu2 +（以CuSO4形式提供），Zn2 +（以ZnCl2计），Ag +（如乳酸银）或Au3 +（如HAuCl4·3H2O）离子加入生长培养基中，缓冲至生理pH值。提供生物学相关性铜源，培养基补充人血浆铜蓝蛋白，剂量复制低和高正常成人血清浓度（250和500 mg / mL）。

动物实验：

将成年雌性CB17-SCID小鼠圈养在受保护的层流设施中，其具有水和含有87ppm锌的标准饮食或含有1,000ppm Zn 2+的锌补充饮食作为乙酸锌。将小鼠皮下注射到来自Carolinas Medical Center患者的高度侵袭性恶性黑素瘤的5×106细胞的右腹股沟。在用于这些实验之前，将冷冻的肿瘤在SCID小鼠中传代两次以使其适应体内生长。在肿瘤注射当天，所有小鼠开始每日施用药物。通过胃管饲法，通过经口部插入胃中的光滑Teflon尖针，给予总体积为0.2mL的药物。研究了四组：肿瘤对照（n = 10;每天0.2mL橄榄油;锌饮食87ppm）;补锌对照组（n = 10;每日0.2 mL橄榄油;锌饮食为1,000 ppm）;双硫仑（n = 10;在0.2 mL橄榄油中200 mg / kg / d双硫仑;锌饮食87 ppm）;和锌补充饮食+双硫仑（n = 10; 200毫克/千克/天双硫仑在0.2毫升橄榄油中;锌饮食为1,000 ppm）。每天检查小鼠，以二维测量肿瘤，并使用椭圆的公式估计肿瘤体积。当在任何动物中估计的肿瘤体积接近500mm 3时，对所有小鼠实施安乐死。切除肿瘤，称重，在福尔马林中固定，切片，染色或免疫染色因子VIII。幻灯片由盲法观察者编码和检查，观察者将血管识别为红细胞沉积物。

• 验证及参考文献

参考文献：

[1]. Chen D, ert al. Disulfiram, a clinically used anti-alcoholism drug and copper-binding agent, induces apoptotic cell death in breast cancer cultures and?xenografts?via?inhibition?of the proteasome?activity. Cancer Res. 2006 Nov 1;66(21):10425-33.

[2]. Wang W, et al. Disulfiram-mediated inhibition of NF-kappaB activity enhances cytotoxicity of 5-fluorouracil in human colorectal cancer cell lines. Int J Cancer. 2003 Apr 20;104(4):504-11.

[3]. Cen D, et al. Disulfiram facilitates intracellular Cu uptake and induces apoptosis in human melanoma cells. J Med Chem. 2004 Dec 30;47(27):6914-20.

[4]. Brar SS, et al. Disulfiram inhibits activating transcription factor/cyclic AMP-responsive element binding protein and human melanoma growth in a metal-dependent manner in vitro, in mice and in a patient with metastatic disease. Mol Cancer Ther. 2004 Sep;3

• 溶解度及制备方案
  
  

DMSO	59 mg/mL (198.96 mM)
Ethanol	59 mg/mL  (198.96 mM)
Water	Insoluble

制备储备液