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首页 Stem Cell Hedgehog/Smoothened inhibitor Purmorphamine,Shh Signaling Antagonist VI, 嘌莫啡胺(CAS#483367-10-8 目录号D803042)
一种平滑受体激动剂,EC50为1 μM。Purmorphamine与Smo拮抗剂竞争性结合到Smoothened,并激活Smoothened,IC50约为1.5 μM,也诱导成骨细胞分化。

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概述
产品名 Purmorphamine
CAS号 483367-10-8
化学式 C₃₁H₃₂N₆O₂
分子量 520.62
溶解度 ≥ 8.7mg/mL in DMSO, ≥ 1.82 mg/mL in EtOH with ultrasonic
靶点 Hedgehog agonist
储存条件 Store at -20°C
用途 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗
纯度 >99%
质控及产品安全说明书
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  • 生物活性


靶点及简介 :Hedgehog agonist

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI)直接结合并激活Smoothened,阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合,在HEK293T细胞中IC50约为1.5 μM,也诱导成骨细胞分化,EC50为1μM。Purmorphamine 可减少基础和诱导的自噬。


分子量520.62
化学式

C31H32N6O2

CAS号483367-10-8
储存条件3年-20°C粉状
1年-80°C溶于溶剂



体外研究:

    根据MTT测定,Purmorphamine(10,20μM)与西罗莫司组合显着降低细胞数量。在第14天,Purmorphamine诱导碱性磷酸酶活性和RUNX-2表达的上调。诱导后第14天在3和5μM剂量的嘌呤胺上检测到骨钙蛋白的上调。在存在或不存在嘌吗啡胺的情况下,基质矿化保持不变[1]。 Purmorphamine诱导小鼠ES细胞系ES14和间充质干细胞系C3H10T1 / 2中的STAT3磷酸化[2]。 Purmorphamine上调人骨髓间充质细胞中成骨细胞表型-ALP活性和骨样结节形成标志物的表达[3]。


细胞实验:

    为了确定小分子的无毒剂量,将5×105个传代-3的人MSC接种在六孔培养板的每个孔中,并在37℃,5%CO 2下在扩增培养基(如上所述)中温育。两天后,将培养基更换为成骨培养基(OM),其由补充有10%FBS,10nM地塞米松,50μg/ mL抗坏血酸2-磷酸和10mMβ-甘油磷酸的α-MEM组成。该OM补充有不同浓度的嘌吗啡胺(1,3,5,10和20μM)和西罗莫司(0.1,1,10,100和200nM)。将培养物再保持2天,然后通过MTT测定,通过以1:5的比例向培养基中加入MTT溶液(PBS中5mg / mL)评估活细胞的存在。然后将细胞在37℃和5%CO 2下孵育。两小时后,除去培养基并向处理过的细胞中加入500μLDMSO以溶解形成区沉淀。在570nm处读取光学吸收率。细胞活力计算为相对于仅用OM处理的对照组的百分比值。



  • 验证及参考文献


验证:

参考文献:

[1]. F. Faghihia, et al. The effect of purmorphamine and sirolimus on osteogenic differentiation of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2013, 67(1): 31-38.

[2]. Gu D, et al. A role for transcription factor STAT3 signaling in oncogene smoothened-driven carcinogenesis. J Biol Chem. 2012 Nov 2;287(45):38356-66.

[3]. Beloti MM, et al. Purmorphamine enhances osteogenic activity of human osteoblasts derived from bone marrow mesenchymal cells. Cell Biol Int. 2005 Jul;29(7):537-41.


  • 溶解度及制备方案
  • DMSO (50ºC 水浴)4 mg/mL  (7.68 mM)
    WaterInsoluble
    EthanolInsoluble

    制备储备液

    1 mg5 mg10 mg
    1 mM1.9208 mL9.6039 mL19.2079 mL
    5 mM0.3842 mL1.9208 mL3.8416 mL


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请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液。


一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。(为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间)。


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