• 生物活性

靶点及简介 ：ERK1 and ERK2 inhibitor

SCH772984是一种新型特异性的ERK1/2抑制剂， IC50分别为4 nM和1 nM。SCH772984是新型，选择性，ATP竞争性的ERK1/2抑制剂。SCH772984抑制ERK底物p90核糖体S6激酶（T359/S363 磷酸化-RSK）的磷酸化，这种作用存在剂量依赖性。SCH772984也能抑制ERK自身活化环中残基的磷酸化。

体外研究

    SCH772984分别显示在大约88％和49％的BRAF-突变体（n = 25）或RAS-突变体（n = 35）肿瘤系中EC50值小于500nM。对SCH772984敏感的黑素瘤细胞的流式细胞术分析显示G1停滞以及指示细胞凋亡的亚G1部分的增加。对于RAS和BRAF（n = 61），不到20％的野生型细胞对SCH772984敏感[1]。

体内研究

    用SCH772984（50mg / kg每天两次）处理BRAF-突变体LOX黑素瘤异种移植物导致98％的肿瘤消退。在KRAS-突变胰腺MiaPaCa模型中也观察到剂量依赖性抗肿瘤活性，在50mg / kg每天两次36％回归。重要的是，肿瘤消退伴随着对肿瘤组织中ERK磷酸化的强烈抑制。通过发病率，致死率或体重减轻来衡量，SCH772984在此时间表上的耐受性良好[1]。

激酶实验

    对于纯化的ERK1或ERK2，以8点稀释曲线一式两份地测试SCH772984。将酶加入反应板中并与化合物一起温育，然后加入底物肽和ATP溶液。将14微升稀释的酶（每个反应0.3ng活性ERK2）加入到384孔板的每个孔中。轻轻摇动平板以混合试剂并在室温下温育45分钟。用60μLIMAP结合溶液（在1x结合缓冲液中1：2,200稀释的IMAP珠子）终止反应。将板在室温下再温育0.5小时，以使磷酸肽与IMAP珠完全结合。在LJL Analyst [1]上读取平板。

细胞实验

    细胞增殖实验以96孔格式（六次重复）进行，BRAFV600E-突变型人黑素瘤细胞系LOXIMV1（LOX）以每孔4,000个细胞的密度接种。在细胞接种后24小时，对于所有浓度，细胞用DMSO或9点IC50稀释液（0.001-10μM）处理，终浓度为1％DMSO。使用ViaLight发光试剂盒在给药后5天测定活力。对于细胞系组生存力测定，用SCH772984处理细胞4天，并通过CellTiterGlo发光细胞活力测定法[1]进行测定。

动物实验

    小鼠[1]裸鼠皮下注射特定细胞系，生长至约100 mm3，随机分为治疗组（10只小鼠/组），腹腔注射SCH772984（12.5,25或50 mg / kg）或载体。肿瘤长度（L），宽度（W）和身高（H）在治疗期间和之后通过卡尺每周两次测量每只小鼠，然后使用公式（L×W×H）/来计算肿瘤体积。 2。每周两次测量动物体重。完成实验后，处理载体和SCH772984处理的肿瘤活组织检查用于Western印迹分析。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Morris EJ, et al. Discovery of a novel ERK inhibitor with activity in models of acquired resistance to BRAF and MEK inhibitors. Cancer Discov. 2013 Jul;3(7):742-50.

• 溶解度及制备方案
  
  

DMSO (warmed with 50ºC water bath)	14 mg/mL  (23.82 mM)
Water	Insoluble
Ethanol	Insoluble


储备液配制

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	1.7016 mL	8.5082 mL	17.0164 mL
5 mM	0.3403 mL	1.7016 mL	3.4033 mL
10 mM	0.1702 mL	0.8508 mL	1.7016 mL

• 
  关键词：SCH772984, SCH772984供应商, ERK抑制剂, 购买SCH772984, SCH772984溶解度, SCH772984结构式