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| 别名 | 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate, 2',7'-二氯荧光素二乙酸酯 |
| 产品名 | H2DCFDA (DCFH-DA) |
| CAS号 | 4091-99-0 |
| 目录号 | D809687 |
| 化学式 | C₂₄H₁₆Cl₂O₇ |
| 分子量 | 487.29 |
| 溶解度 | ≥ 150 mg/mL in DMSO(307.82 mM); 14.29 mg/mL in Ethanol(29.33 mM); < 0.1 mg/mL in H2O(insoluble) |
| 靶点 | <p>A fluorescent probe used as an indicator of peroxynitrite formation</p> |
| 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| 用途 | 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗 |
| 纯度 | >99% |
靶点及简介 ：
A fluorescent probe used as an indicator of peroxynitrite formation
H2DCFDA是可渗透细胞，用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针。H2DCFDA可以用于细菌活性氧（ROS）产生的测定。
| 分子量 | 487.29 | ||
|---|---|---|---|
| 化学式 | C24H16Cl2O7 | ||
| CAS号 | 4091-99-0 | ||
| 储存条件 | 3年 | -20°C | 粉状 |
| 1年 | -80°C | 溶于溶剂 | |
体外研究
通过流式细胞术分析H2DCFDA探针氧化表明，difESCs中ROS的基础水平比胚胎干细胞（ESC）大约6-7倍。 H2DCFDA和DCFDA探针都以其初始形式是非荧光的，但它们在细胞内经历多步转化，导致荧光产物二氯荧光素（DCF）的形成。这两种探针之间的唯一区别是H2DCFDA的转化涉及氧化。因此，与DCFDA探针相关的荧光相反，H2DCFDA处理的细胞的荧光取决于细胞内ROS水平。令人惊讶的是，流式细胞术分析显示，ESC和负载H2DCFDA的difESC的荧光水平之间的差异接近来自DCFDA处理的细胞的信号之间的差异。后者表明ESCs中氧化H2DCFDA荧光信号低的ROS依赖性原因[1]。
激酶实验
将H2DCFDA溶解在DMSO中以获得10mM储备溶液，并在使用前进一步稀释[1]。 ROS测量[1]为了检测细胞内ROS水平，使用ROS敏感性探针H2DCFDA。将贴壁细胞（ESC，difESC，eMSC，HeLa，U118）与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟，然后用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液收获，悬浮在新鲜培养基中，并且用流式细胞仪立即分析。将对照和PHA活化的淋巴细胞重悬浮于PBS中，与5μMH2DCFDA在黑暗中于37℃温育30分钟，并立即分析。如果需要，与H2DCFDA探针一起使用荧光素染料DCFDA的ROS不敏感修饰。染色程序与H2DCFDA [1]相同。
验证：
参考文献：
| DMSO | 97 mg/mL (199.06 mM) |
| Ethanol | 7 mg/mL (14.37 mM) |
| Water | Insoluble |
| Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.0522 mL | 10.2608 mL | 20.5217 mL |
| 5 mM | 0.4104 mL | 2.0522 mL | 4.1043 mL |
| 10 mM | 0.2052 mL | 1.0261 mL | 2.0522 mL |
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液。
一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。（为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间)。
我们确保产品在保持试剂质量的条件下运输。收到产品后，请遵循产品数据表上的存储建议。
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