• 生物活性

靶点及简介 ：

G9a and GLP inhibitor，BIX-01294三盐酸盐是一种可逆的高选择性G9a组蛋白甲基转移酶抑制剂,在DELFIA分析中IC50为2.7μM。BIX-01294三盐酸盐特异性抑制G9a(H3K9me2)和GLP酶(H3K9me3),IC50分别为1.7μM和38μM。BIX-01294三盐酸盐通过与底物赖氨酸残基的氨基酸N端竞争结合来抑制G9a/GLP。BIX-01294三盐酸盐,一种(1H-1,4-二氮杂卓-1-基)-喹唑啉-4-基胺衍生物,诱导坏死性下垂和自噬。对复发肿瘤细胞具有抗肿瘤活性

BIX01294 是一种G9a histone methyltransferase抑制剂，无细胞试验中IC50为2.7 μM，降低大部分组蛋白H3K9me2，也微弱抑制GLP（主要是H3K9me3），对其他组蛋白甲基转移酶没有显著的抑制活性。BIX01294 可诱导自噬。BIX01294 还可通过癌蛋白 NSD1、NSD2 和 NSD3 来抑制H3K36甲基化。

体外研究：

    BIX-01294（2μM；48 h）三盐酸盐选择性抑制复发性肿瘤细胞生长[1]。BIX-01294（1μM）三盐酸盐导致MLKL的S345磷酸化显著增加[1]。BIX-01294（1μM）三盐酸盐显著上调复发性肿瘤细胞系中典型的p53靶点Cdkn1a（p21）和Gadd45a[1]。BIX-01294（1μM；6天）三盐酸盐导致原发性和复发性肿瘤细胞中H3K9me2水平降低[1]。BIX-01294三盐酸盐导致复发肿瘤细胞坏死性细胞死亡。Necrostatin-1（30μM）部分逆转BIX-01294（750 nM；24 h）三盐酸盐诱导的细胞死亡[1]。BIX-01294（4.1μM；持续2天）三盐酸盐可使小鼠ES细胞中H3K9me2中未修饰的H3K9片段减少约20%，同时相应增加。BIX-01294三盐酸盐导致野生型ES细胞中H3K9me2显著减少，H3K9me3和H3K9me1略有减少[2]。BIX-01294三盐酸盐即使在45μM浓度下也不会抑制其他组蛋白甲基转移酶。BIX-01294三盐酸盐在测试浓度范围内（高达10μM）不会影响SUV39H1（H320R）和PRMT1[2]。BIX-01294三盐酸盐以与S-腺苷甲硫氨酸（SAM）无竞争性的方式抑制G9a[2]。BIX-01294（1µg/mL）导致胎儿PASMC的BrdU掺入减少。BIX-01294治疗可减少PDGF诱导的PASMC迁移[3]。细胞活力测定[1]细胞系：原发或复发肿瘤细胞浓度：2μM培养时间：48h结果：选择性抑制复发肿瘤细胞生长。

体内研究：

    BIX-01294三盐酸盐（10 mg/kg；IP；每周三次，共2周）可显著降低复发肿瘤细胞的肿瘤生长和肿瘤负担。原发性肿瘤生长不受抑制[1]。动物模型：雌性MMTV-rtTA；具有复发性或原发性肿瘤细胞的TetO-Her2/neu（MTB；TAN）和TetO-Her2/neu（TAN）小鼠[1]剂量：10 mg/kg给药：IP；结果：显著降低复发肿瘤细胞的肿瘤生长和肿瘤负担。原发性肿瘤生长不受抑制。降低裸体裸鼠原位复发肿瘤的生长速度。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Nathaniel W Mabe, et al. G9a Promotes Breast Cancer Recurrence through Repression of a Pro-inflammatory Program. Cell Rep. 2020 Nov 3;33(5):108341.

[2]. Stefan Kubicek, et al. Reversal of H3K9me2 by a small-molecule inhibitor for the G9a histone methyltransferase. Mol Cell. 2007 Feb 9;25(3):473-81.

[3]. Yang Q, et al. BIX-01294 treatment blocks cell proliferation, migration and contractility in ovine foetal pulmonary arterial smooth muscle cells. Cell Prolif. 2012 Aug;45(4):335-44.

[4]. Iwona Anna Ciechomska, et al. BIX01294, an inhibitor of histone methyltransferase, induces autophagy-dependent differentiation of glioma stem-like cells. Sci Rep

• 溶解度及制备方案
  

  DMSO	98 mg/mL    (163.33 mM)
  Water	98 mg/mL    (163.33 mM)
  Ethanol	8 mg/mL    (13.33 mM)

  制备储备液Preparing Stock Solutions

  Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
  1 mM	1.67 mL	8.33 mL	16.67 mL
  5 mM	0.33 mL	1.67 mL	3.33 mL
  10 mM	0.17 mL	0.83 mL	1.67 mL
  50 mM	0.03 mL	0.17 mL	0.33 mL