• 生物活性

靶点及简介 ：Protein kinase inhibitor,potent and cell permeable. 

Staurosporine是一种有效，非选择性蛋白激酶抑制剂，抑制 PKC，PKA，c-Fgr，和 Phosphorylase kinase 的 IC50 分别为 6 nM，15 nM，2 nM，3 nM。

Staurosporine (AM-2282)是一种有效的PKC抑制剂，作用于PKCα， PKCγ和PKCη时，IC50分别为2 nM， 5 nM和4 nM，对PKCδ(20 nM)， PKCε(73 nM)和PKCζ(1086 nM)作用效果稍弱。Staurosporine 也强抑制HeLa S3细胞，IC50为4 nM。Staurosporine 也抑制多种其他蛋白激酶，包括PKA, PKG, 磷酸激酶, S6 激酶, 肌球蛋白轻链激酶(MLCK), CAM PKII, cdc2, v-Src, Lyn, c-Fgr, 和Syk ， IC50分别为 15 nM, 18 nM, 3 nM, 5 nM, 21 nM, 20 nM, 9 nM, 6 nM, 20 nM, 2 nM, 和 16 nM。 Staurosporine (1 μM) 诱导 PC12细胞90%以上凋亡,这种作用可被过量表达的Bcl-2抑制,或者zVAD-fmk, cycloheximide (10 μM) 及actinomycin D (5 μM)处理也可抑制。

体外研究     Staurosporine广泛用作具有广谱活性的蛋白激酶C（PKC）抑制剂，是从Streptomyces staurospores的培养液中分离的生物碱。 MC3T3E-1成骨细胞暴露于Staurosporine（100 nM）12 h，释放出与对照细胞释放相似的LDH（12.4±3.1％）（10.0±2.4％），表明裂解相对缺失死亡，发生在坏死。此外，用星形孢菌素（100nM）处理导致形态学变化，细胞凋亡的特征：在Hoechst 33258染色后通过荧光显微镜观察到的亮蓝色荧光凝聚核，并且细胞体积减少[2]。

体内研究    星形孢菌素的抑制作用在肿瘤促进的Wk10左右具有统计学意义。尽管在实验的后几周中10ng的星形孢菌素没有获得统计学上显着的抑制，但是带有肿瘤的小鼠的百分比和每只小鼠的平均肿瘤数量的下降趋势是明显的。因此，Staurosporine稍微抑制了Teleocidin的肿瘤促进，即使在Staurosporine本身诱发肿瘤的剂量[3]。即使在病变后2周开始给药，Staurosponne（0.05和0.1 mg / kg腹膜内）减弱了水迷宫和被动回避任务的受损性能。此外，Staurosporine（0.1 mg / kg）部分逆转了由基底前脑损伤引起的额顶皮质中胆碱乙酰转移酶活性的降低。这些结果表明，Staurosporine通过逆转基底前脑损伤诱导的胆碱能神经元损伤减轻学习障碍[4]。

激酶实验    将MC3T3E-1细胞（2×10 6个细胞/组）用100nM星形孢菌素处理不同的时间段并在裂解缓冲液中裂解（EB缓冲液：1％Triton X-100,10mM Tris，pH 7.6,50mM NaCl， 1mg / mL抑肽酶，5mM EDTA，50mM NaF，0.1％2-巯基乙醇和100μM原钒酸钠）。将细胞裂解物在12000g，4℃下离心30分钟。收集可溶性级分并与抗JNK1抗体一起温育。在冰上孵育3小时后，将100μL10％福尔马林固定的金黄色葡萄球菌溶液加入到抗JNK1免疫沉淀物中，并进一步在冰上孵育1小时。用EB缓冲液和PAN缓冲液（10mM PIPES缓冲液，pH7.0,1％抑肽酶，100mM NaCl）洗涤吸收的免疫复合物两次。免疫复合物与2μgGST-c-Jun NT1-79蛋白作为底物在30μL含有2μM冷ATP，2 mM DTT，20 mMMgCl2,2μCi[γ33-P] -ATP的反应缓冲液中混合和20mM Tris-HCl，pH 7.5,30℃，20分钟。通过加入15μL3×SDS-PAGE样品缓冲液并在98℃下煮沸5分钟终止反应。蛋白质在12％SDS-PAGE上分离，并通过半干电转移系统转移到硝酸纤维素膜上。用兔抗JNK1抗体和辣根过氧化物酶缀合的抗兔抗体对膜进行免疫印迹，以显现通过增强的化学发光系统测量的信号。将凝胶在真空下干燥，通过放射自显影观察磷酸转移酶活性，并通过PhosphoImager分析仪定量[2]。

动物实验    小鼠[3]使用雌性CD-1小鼠。将10μL丙酮中的各种量的星形孢菌素施用于8周龄CD-1小鼠的耳朵。刺激程度表示为引起刺激的化合物的最小剂量。小鼠皮肤中HOC的诱导将0.1mL丙酮中的星形孢菌素施用于CD-1小鼠背部的皮肤，18小时后从皮肤获得粗酶提取物。 HDC活性表示为每1h孵育每mg蛋白质释放的CO 2 pmol。诱导小鼠皮肤中的ODC将0.2mL丙酮中的星形孢菌素施用于CD-1小鼠背部的皮肤。 4小时后，从表皮制备粗酶提取物，并测量其ODC活性。酶活性表示为每30分钟孵育每mg蛋白质的nmol CO2。大鼠[4]使用雄性Kbl Wistar大鼠（体重270至310g）。在给予星形孢菌素2周的组中，在BF损伤后2周开始水迷宫任务和星形孢菌素给药，并且在BFlesion后4周进行被动回避任务。在水迷宫训练和被动回避任务采集之前30mm，大鼠接受剂量为0.01,0.03,0.1和0.3mg / kg（ip，每组N = 10，持续2周）的Staurosporine。在给予星形孢菌素4周的组中，首先在BF损伤后2周给予药物。水迷宫任务在BF损伤后4周进行。被动回避任务在BF病变后6周进行。大鼠在训练前每天一次接受0.05,0.1和0.2 mg / kg（ip，N =每组10）的Staurosporine，持续2周，在水迷宫训练和被动回避任务获取试验后持续2周。将星形孢菌素悬浮在0.3％的羧甲基纤维素钠中。将载体以与星形孢菌素处理的动物相同的方案施用于未损伤的对照和损伤的对照。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Meggio F, et al. Different susceptibility of protein kinases to staurosporine inhibition. Kinetic studies and molecular bases for the resistance of protein kinase CK2. Eur J Biochem. 1995 Nov 15;234(1):317-22.

[2]. Chae HJ, et al. Molecular mechanism of staurosporine-induced apoptosis in osteoblasts. Pharmacol Res. 2000 Oct;42(4):373-81.

[3]. Yoshizawa S, et al. Tumor-promoting activity of staurosporine, a protein kinase inhibitor on mouse skin.Cancer Res. 1990 Aug 15;50(16):4974-8.

[4]. Nabeshima T, et al. Staurosporine facilitates recovery from the basal forebrain-lesion-induced impairment of learning and deficit of cholinergic neuron in rats. J Pharmacol Exp Ther. 1991 May;257(2):562-6.

• 溶解度及制备方案
  

  DMSO	46 mg/mL (98.60 mM)
  Water	Insoluble
  Ethanol	Insoluble

  制备储备液
  

Concentration / Solvent Volume / Mass	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	2.14 mL	10.72 mL	21.43 mL
5 mM	0.43 mL	2.14 mL	4.29 mL
10 mM	0.21 mL	1.07 mL	2.14 mL
50 mM	0.04 mL	0.21 mL	0.43 mL



关键词：Staurosporine (AM-2282), AM-2282; STS; CGP 41251, Staurosporine (AM-2282)供应商, PKC抑制剂, 购买Staurosporine (AM-2282), Staurosporine (AM-2282)溶解度, Staurosporine (AM-2282)结构式