• 生物活性

靶点及简介 ：

A RIP1 inhibitor，Necrostatin-1是一种有效，选择性和可渗透细胞的坏死性凋亡 (necroptosis) 抑制剂，是抑制细胞坏死的有力工具。在Jurkat细胞中的 EC50 为490 nM。它通过抑制坏死性凋亡途径中的死亡域受体激酶RIP (RIP1) 起作用。Necrostatin-1也可抑制 IDO、细胞自噬和凋亡。

体外研究：

    Necrostatin-1（Nec-1）是在多种细胞类型中存在胱天蛋白酶抑制的情况下由死亡域受体（DR）刺激引起的细胞死亡的特异性和有效的小分子抑制剂。 Necrostatin-1有效抑制TNFα诱导的L929细胞坏死死亡，不需要外源性caspase抑制剂[1]。 Necrostatin-1（Nec-1）可阻止放射性对比培养基（RCM）诱导的管周毛细血管扩张，这表明RIP1激酶结构域在调节微血管血流动力学和造影剂诱导的AKI（CIAKI）的病理生理学方面与细胞死亡无关的新作用[2]。通过Necrostatin-1（Nec-1）预处理在1.5小时分别为92.3％和82.9％，在3.0小时分别为84.4％和78.6％，改善由3.0μM和6.0μM紫草素引起的C6胶质瘤细胞活力的降低。同样，Ucr胶质瘤细胞的生存能力由Necrostatin-1在1.5小时时升高至91.6％和81.5％，在3.0小时时分别升高81.8％和71.2％[3]。 Necrostatin-1（Nec-1）（30μM）通过抑制坏死细胞死亡来增加心肌细胞祖细胞（CMPCs）的存活[4]。

体内研究:

    Necrostatin-1（Nec-1）诱导肾小管移位并影响RCM应用后肾小管周围毛细血管扩张的动力学。在RCM前15分钟单次腹膜内施用单剂量的Necrostatin-1（1.65 mg / kg体重，腹腔注射），在观察期内防止恢复至基线水平[2]。

细胞实验:

    将C6（3×10 5细胞/孔）和U87（1.5×10 5细胞/孔）胶质瘤细胞接种到96孔微量培养板上并培养24小时。将PBS加入对照组，并将紫草素加入实验组中以达到最终浓度。在指定时间点处紫草素处理后使用MTT测定评估细胞活力。使用自动多孔分光光度计读取570nm处的吸光度值（A）。来自相同细胞系的两组神经胶质瘤细胞分别用较低或较高浓度的紫草素处理;在与指定浓度的紫草素共孵育之前，用100μMNecrostatin-1或40μMz-VAD-fmk处理另外两组神经胶质瘤细胞1小时。此外，另外两组胶质瘤细胞仅在相应的时间点用100μMNecrostatin-1或40μMZ-VAD-fmk治疗[3]。

动物实验:

    使用小鼠[2] 8-10周龄雄性C57BL / 6小鼠（平均体重约23g）。小鼠通过尾静脉静脉内施用200μLPBS或放射性对比培养基（RCM）。腹膜内施用单剂量的Z-VAD-fmk（10mg / kg体重）或Necrostatin-1（1.65mg / kg体重）15分钟。在RCM注射之前。在RCM施用后24小时（再灌注后48小时）收获小鼠。从眶后出血获得血液样品，并测定尿素和肌酸酐的血清水平。

• 验证及参考文献

验证：

参考文献：

[1]. Degterev A, et al. Chemical inhibitor of nonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic brain injury. Nat Chem Biol. 2005 Jul;1(2):112-9.

[2]. Linkermann A, et al. The RIP1-kinase inhibitor necrostatin-1 prevents osmotic nephrosis and contrast-induced AKI in mice. J Am Soc Nephrol. 2013 Oct;24(10):1545-57.

[3]. Huang C, et al. Shikonin kills glioma cells through necroptosis mediated by RIP-1. PLoS One. 2013 Jun 28;8(6):e66326.

[4]. Feyen D, et al. Increasing short-term cardiomyocyte progenitor cell (CMPC) survival by necrostatin-1 did not further preserve cardiac function. Cardiovasc Res. 2013 Jul 1;99(1):83-91.

[5]. Zhou K, et al. RIP1-RIP3-DRP1 pathway regulates NLRP3 inflammasome activation following subarachnoid hemorrhage. Exp Neurol. 2017 Sep;295:116-124.

• 溶解度及制备方案
  

  DMSO (50ºC水浴)	52 mg/mL  (200.52 mM)
  Water	Insoluble
  Ethanol	Insoluble

  
  

  制备储备液

  浓度  溶剂体积   质量	1 mg	5 mg	10 mg
  1 mM	3.8561 mL	19.2805 mL	38.5609 mL
  5 mM	0.7712 mL	3.8561 mL	7.7122 mL
  10 mM	0.3856 mL	1.9280 mL	3.8561 mL
  50 mM	0.0771 mL	0.3856 mL	0.7712 mL

  
  

  
  

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